Medición de β-hCG procedente de líneas celulares de coriocarcionoma humano JEG-3 BeWo por QLIA
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Abstract
Introduction: The cell lines JEG-3 and BeWo are clonal derivates of choriocarcinoma of human placenta and share some properties of immature human trophoblast cells, including the secretion of β-hCG, and thus they have been proposed as a trophoblast producer of hormones model. Beta subunit (β-hCG) is usually measured in clinical laboratory using the QLIA immunoassay method. Objective: The objective of this study is to evaluate the use of the automated IE technique in the quantification of the β-hCG produced from a culture system verifying potential interferents when a measurement matrix, supported by the clinical laboratory, is changed. Materials and Methods: Cell lines JEG-3 and BeWo were cultured in RMMI 1640 with the aim of establishing the capacity to produce β-hCG after 48 hours of culture compared witgh serums of normal pregnant women. To determine the concentration of the hormone, we used the Integrated System VITROS 5600 and the reactive Total β-hCG II of the clinical laboratory Ortho Clinical Diagnostics utilizing serums of pregnant women with different concentrations of β-hCG. Results and Conclusions: A low rate of recovery of β-hCG measured from cell cultures was obtained probably due to phenol red which could be one of the most involved interferents in the measurement.
Resumen en español
Introducción: Las líneas celulares JEG-3 y BeWo son derivados clonales de coriocarcinoma de placenta humana y comparten algunas propiedades de las células trofoblásticas humanas inmaduras, entre ellas la secreción β-hCG, por lo que han sido propuestas como un modelo de trofoblasto productor de hormonas. La medición de la subunidad beta (β-hCG) se realiza generalmente en el laboratorio clínico por el método de Inmunoensayo por QLIA. Objetivo: El objetivo del presente estudio es evaluar el uso de la técnica de IE automatizada en la cuantificación de la β-hCG procedente de un sistema de cultivo verificando interferentes potenciales cuando se cambia de matriz de medición avalada por la casa comercial Materiales y Métodos: Se utilizó Se cultivaron las líneas celulares JEG-3 y BeWo en RMMI 1640 con el fin de establecer la capacidad de producir β-hCG después de 48 horas de cultivo comparados a sueros de gestantes normales. Para determinar la concentración de la hormona se utilizó el Sistema Integrado VITROS® 5600 y el reactivo Total β-hCG II de la casa comercial Ortho Clinical Diagnostics. Sueros de gestantes con diferentes concentraciones de la β-hCG. Resultados y Conclusiones: Se obtuvo un bajo porcentaje de recuperación de la β-hCG medida a partir de cultivos celulares probablemente debida al rojo de fenol que pudiera ser uno de los interferentes de mayor participación en la medición.